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一种低醇手消毒液消毒效果观察
张青1 李涛 周铁生 张流波2
在一些感染性疾病的传播中，手常常起着关键的作用。杀灭或清除手上的常居菌和暂居菌，通过手消毒保证手部卫生对控制医院感染起着非常重要的作用。醇类消毒剂由于具有快速、安全的特点，被世界卫生组织所推荐，能同时用于卫生手和外科手的消毒。但由于醇类消毒剂的皮肤刺激性强，特别是其脱脂作用，必须与大量的护肤剂同时使用。按照卫生部《医务人员手卫生规范》标准的要求，根据诊疗工作开展情况，一名医护人员每天需要手消毒数十次到上百次，而每次使用手消毒剂后都需要使用护肤剂，以保护手部皮肤。护肤剂的价格显著地高于酒精，其大量应用极大地增加了手消毒的使用成本，在我国目前的经济条件下，不利于手卫生的推广应用。因此，在保证快速、安全的前提下，尽量降低手消毒剂中醇的剂量，减少醇对皮肤的刺激性，进而减少护肤剂的使用，降低使用成本对推广手卫生意义重大。上海九誉公司生产的安立久手部皮肤消毒液采用复配技术，将异丙醇与一些单、双链季铵盐复配，减少了醇的使用量进而减少了普通手消毒剂的刺激性。我们为研究复配低醇手消毒液的消毒能力，对该消毒剂的有关消毒效果进行了实验室研究和现场消毒效果观察，现将结果报告如下。
一.器材
1、菌株: 金黄色葡萄球菌ATCC 6538（第5～8代）
大肠杆菌8099（第6～8代）
白色念珠菌ATCC 10231（第5～6代）
2、手消毒剂：安立久手部皮肤消毒液（上海九誉公司生产，主要成分复合季铵盐0.14％～0.17％，异丙醇：35％）
3、中和剂: 0.5％卵磷脂＋1％吐温80＋1％组氨酸的0.03mol/L PBS（经中和剂鉴定试验合格））
4、稀释液:胰蛋白胨生理盐水溶液（TPS）
5、培养基:胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）
胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB）
沙氏琼脂培养基
6、载体：布片（1.0×1.0cm）
二．方法
1、载体浸泡定量杀菌试验
试验物品在于20℃±1℃水浴并恒温后进行试验。
按《消毒技术规范》（2002年版）制备试验用菌片。按每片5.0ml用量，将消毒剂原液分装到无菌平皿中，加入菌片，浸泡至预定时间，将菌片移入含5.0ml中和剂溶液的试管中。中和作用10min，振打80次后，取1ml洗脱液或稀释液进行活菌培养，作为试验组样本。同时将菌片浸泡于硬水中，其他步骤同以上方法作为阳性对照组样本。用同批次试验的培养基作为阴性对照组。将试验组样本、阳性对照组样本和阴性对照组样本放置37℃温箱中培养，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌培养48小时记录结果，白色念珠菌培养72小时记录结果。
2、消毒剂对手消毒现场试验
实验对象为研究者所在医院的医护人员和实验室工作人员。试验时，受试者双手相互搓擦后，用无菌棉拭在含稀释液的试管中浸湿，在左手五指屈面指尖至指根，往返涂擦2遍。采样后，以无菌操作方式将棉拭采样端剪入稀释液试管中作为阳性对照组样本。将安立久手部皮肤消毒液对右手进行消毒，使手掌、手指至完全湿润(每次约3.0ml左右），作用1min, 其他步骤同以上方法采样，将棉拭采样端剪入中和剂试管中作为试验组样本。用同批次试验的培养基作为阴性对照组。将试验组样本、阳性对照组样本和阴性对照组样本放置37℃温箱中培养48小时记录结果。试验环境温度为23～27℃，相对湿度为25％－40％。
3、消毒效果合格评价标准
根据《消毒技术规范》（2002年版）的规定，载体浸泡定量杀菌试验杀灭对数值≥3.00，可判定为消毒效果。 现场试验杀灭对数值≥1.00，达到消毒效果。
三．结果
1、对试验菌的实验室杀灭效果
安立久手部皮肤消毒液原液作用0.5min、1.0min和1.5min，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的杀灭对数值均＞3.00（表一）。
表一 安立久手部皮肤消毒液杀菌试验结果
|
试验菌株 |
阳性对照组平均菌落数的对数值 |
作用不同时间（min）的平均杀灭对数值 |
||||
|
0.5 |
1.0 |
1.5 |
||||
|
金黄色葡萄球菌 （ATCC 6538） |
6.17 （6.05～6.22） |
＞3.00 |
＞3.00 |
＞3.00 |
||
|
大肠杆菌 （8099） |
6.48 （6.36～6.53） |
＞3.00 |
＞3.00 |
＞3.00 |
||
|
白色念珠菌 （ATCC10231） |
6.32 （6.30～6.33） |
＞3.00 |
＞3.00 |
＞3.00 |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
注：阴性对照无菌生长
2、手消毒的现场试验结果
将安立久手部皮肤消毒液原液涂擦于手掌、手指至完全湿润(每次约3.0ml左右），作用1min, 对手表面自然菌的平均杀灭对数值为1.18（表二）。
表二 安立久手部皮肤消毒液对手消毒现场试验结果
|
样品编号 |
对照组菌落数 （cfu/手） |
试验组菌落数 （cfu/手） |
杀灭对数值 |
样品编号 |
对照组菌落数 （cfu/手） |
试验组菌落数 （cfu/手） |
杀灭对 数值 |
|
1 |
54500 |
7050 |
0.89 |
16 |
490 |
0 |
＞2.69 |
|
2 |
128500 |
1875 |
1.84 |
17 |
2450 |
515 |
0.68 |
|
3 |
10800 |
1355 |
0.90 |
18 |
2950 |
65 |
1.66 |
|
4 |
415 |
115 |
0.56 |
19 |
6250 |
2360 |
0.42 |
|
5 |
12150 |
270 |
1.65 |
20 |
505 |
25 |
1.31 |
|
6 |
585 |
60 |
0.99 |
21 |
2000 |
675 |
0.47 |
|
7 |
1500 |
225 |
0.82 |
22 |
6200 |
775 |
0.90 |
|
8 |
51000 |
2075 |
1.39 |
23 |
155 |
30 |
0.71 |
|
9 |
3250 |
425 |
0.88 |
24 |
51000 |
180 |
2.45 |
|
10 |
425 |
195 |
0.34 |
25 |
170 |
50 |
0.53 |
|
11 |
2585 |
1340 |
0.29 |
26 |
35900 |
3105 |
1.06 |
|
12 |
1025 |
315 |
0.51 |
27 |
1950 |
1405 |
0.14 |
|
13 |
1900 |
290 |
0.82 |
28 |
7200 |
285 |
1.40 |
|
14 |
9500 |
590 |
1.21 |
29 |
2350 |
400 |
0.77 |
|
15 |
3500 |
465 |
0.88 |
30 |
2250 |
65 |
1.54 |
|
合计 30人次 平均杀灭对数值 1.18 |
|||||||
注：阴性对照无菌生长
四．讨论
1、实验研究表明，安立久手部皮肤消毒液作用0.5min对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的杀灭对数值均＞3.00；经30人次手消毒现场试验结果表明，安立久手部皮肤消毒液作用1min,对手表面自然菌的平均杀灭对数值为1.18。达到并超过了我国手消毒剂的消毒效果。
2、一般来讲，卫生手消毒只考虑居于皮肤表层，常规洗手消毒容易被清除的暂居菌，而外科手消毒除考虑暂居菌外，还应考虑皮肤上持久固有寄居的常居菌，如凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌类、丙酸菌属、不动杆菌属等。我国目前的手消毒剂评价体系还没有考虑常居菌和暂居菌的问题，卫生手消毒剂基本上一般都可作为外科手消毒剂使用。这种安排可能使外科手消毒剂存在一定的潜在风险。为此，我们参照尚在讨论中的《外科手消毒剂评价标准》对安立久手部皮肤消毒液进行了初步评价，发现该消毒剂按新标准评价也已经具备外科手消毒的能力。
3、已有资料显示季铵盐消毒剂的皮肤刺激性低，该复配消毒剂的皮肤刺激性应该主要来自于异丙醇，而异丙醇的刺激性与其浓度有密切关系，浓度越高，刺激性越强。该消毒剂异丙醇的浓度只有常见异丙醇消毒剂的一半，可以显著地降低皮肤刺激性。
4、常见的醇类手消毒剂难以杀灭各种肠道病毒，复配消毒剂应该是解决此问题的有效途径。该消毒剂的杀病毒能力值得进一步研究。